HYDRO PHÂN TỬ VÀ BỆNH TĂNG HUYẾT ÁP

     Tăng huyết áp là một căn bệnh phổ biến trên toàn thế giới. Theo thống kê của Tổ chức Y tế Thế giới, số người bị tăng huyết áp không kiểm soát được trên toàn thế giới là gần 1 tỷ người, và số ca tử vong do căn bệnh này gây ra chiếm 12% số ca tử vong ở người trưởng thành.

     Tăng huyết áp thông thường nói chung không gây tử vong. Nhưng số liệu dịch tễ học cho thấy nguy cơ đột quỵ ở bệnh nhân tăng huyết áp cao gấp 4 - 6 lần người bình thường. Hiện nay, mục tiêu chính của điều trị tăng huyết áp là phục hồi huyết áp về trị số bình thường và giảm tỷ lệ mắc và tử vong do các bệnh tim mạch và mạch máu não ở bệnh nhân tăng huyết áp. Vì vậy, việc phòng ngừa và kiểm soát bệnh tăng huyết áp là rất quan trọng. May mắn thay, tác dụng hỗ trợ của hydro đối với khách hàng bị cao huyết áp của chúng tôi ngăn ngừa và kiểm soát huyết áp rất tốt. Ví dụ, uống nước hydro, thở hydro, hoặc tắm bằng bọt hydro.

     Hydro có tác dụng bảo vệ tế bào nội mô mạch máu do nhiều nguyên nhân khác nhau. Nó duy trì sự điều hòa trương lực mạch máu bình thường và cho thấy sự giảm huyết áp. Nhiều người nhận thấy rằng nam giới tiếp tục uống nước hydro với lượng vừa đủ hoặc hít hydro trong thời gian dài sẽ có sự cải thiện rõ rệt về khả năng tình dục. Tế bào nội mô mạch máu có khả năng cải thiện. Bệnh tế bào nội mô mạch máu là nguyên nhân phổ biến của các bệnh chuyển hóa như đái tháo đường lâu năm, tăng lipid máu, tăng acid uric máu. Tế bào nội mô của những bệnh nhân mắc các bệnh này thường có mức độ suy giảm khác nhau, cần tập trung bảo vệ

     Một nghiên cứu lâm sàng gần đây đã chứng minh rằng chạy thận nhân tạo bằng dịch lọc có chứa hydro (H2) cải thiện kiểm soát huyết áp trong bệnh thận giai đoạn cuối. Ở đây, chúng tôi đã kiểm tra xem H2 có nghiên cứu về tăng huyết áp ở mô hình động vật. Chúng tôi đã để 5/6 con chuột bị thận hư hít phải của hỗn hợp khí H2 (1,3% H2 + 21% O2 + 77,7% N2) hoặc hỗn hợp khí đối chứng (21% O2 + 79% N2) trong 1 giờ mỗi ngày. H2 bị ức chế đáng kể làm tăng huyết áp sau khi cắt thận 5/6. Thuốc chống tăng huyết áp Sự phát tán H2 cũng được xác định ở chuột ở trạng thái tăng huyết áp ổn định 3 tuần sau khi cắt bỏ thận. Để kiểm tra mức độ ảnh hưởng chi tiết của H2 đối với bệnh tăng huyết áp, chúng tôi đã sử dụng một hệ thống đo từ xa được cấy ghép để liên tục theo dõi huyết áp. H2 có tác dụng chống tăng huyết áp không chỉ vào ban ngày nghỉ ngơi, mà còn trong các hoạt động ban đêm. Phân tích quang phổ về sự thay đổi huyết áp cho thấy rằng H2 cải thiện sự mất cân bằng tự chủ, cụ thể là bằng cách ức chế thần kinh giao cảm hoạt động quá mức hệ thống và tăng cường hoạt động của hệ thần kinh phó giao cảm; những sự phát triển này cùng xảy ra với hạ huyết áp. Kết luận, tiếp xúc với H2 trong 1 giờ hàng ngày có tác dụng chống tăng huyết áp gây tăng huyết áp trên mô hình động vật.

     Hydro phân tử (H2) là một loại khí đa năng có đặc tính chống oxy hóa và chống viêm nhiễm và không có biểu hiện rõ ràng bên efects1 . Trước đây chúng tôi đã chứng minh trên các mô hình động vật rằng hít khí H2 là một phương pháp điều trị đầy hứa hẹn đối với chấn thương do thiếu máu cục bộ – tái tưới máu trong các cơ sở chăm sóc khẩn cấp và quan trọng như nhồi máu cơ tim cấp, ngừng tim và sốc xuất huyết 2-5.

     Chúng tôi cũng đã tiến hành một nghiên cứu lâm sàng bằng chứng về khái niệm để xác nhận Tính hiệu quả và an toàn của liệu pháp hít khí H2 cho bệnh nhân nhồi máu cơ tim cấp và sau tim hội chứng bắt giữ6,7 . Một thử nghiệm đối chứng ngẫu nhiên, mù đôi, đa trung tâm hiện đang được tiến hành để kiểm tra điều trị thải độc H2 trên tổn thương não ở bệnh nhân được hồi sức sau ngừng tim để lấy dược phẩm Sự chấp thuận của Bộ Y tế, Lao động và Phúc lợi . Ngoài việc ức chế thiếu máu cục bộ - tái tưới máu thương tích, H2 đã được chứng minh trong các nghiên cứu trên động vật để ngăn chặn hiệu quả các cơn bão cytokine ở trạng thái phản ứng quá mức của hệ thống miễn dịch. Đáng chú ý, Ủy ban Y tế và Sức khỏe Quốc gia Trung Quốc khuyến cáo hít H2 ngoài liệu pháp O2 nói chung để điều trị bệnh do coronavirus 2019 (COVID-19) viêm phổi liên quan hoặc gần đây là hội chứng suy hô hấp cấp và nhiễm H2 do hít phải ở bệnh nhân COVID-19 báo cáo 9,1

     Tỷ lệ tăng huyết áp trên toàn cầu ở người lớn được  ước  tính là 1,13 tỷ 11. Tăng huyết áp là một nguy cơ cao yếu tố gây bệnh tim mạch và bệnh thận mãn tính, với tăng huyết áp được quan sát thấy ở hơn 80% bệnh nhân mắc bệnh thận mãn tính12,13. Khi tăng huyết áp làm tăng nhanh sự suy giảm chức năng thận và thúc đẩy sự phát triển của bệnh tim mạch, quản lý thích hợp tăng huyết áp ở bệnh nhân bệnh thận mãn tính là điều tối quan trọng .14,15. Mặc dù tầm quan trọng của việc kiểm soát huyết áp đã nhấn mạnh, hơn 60% bệnh nhân tăng huyết áp không hạ huyết áp xuống mức mức mục tiêu16. Gần đây, Nakayama et al. đã phát triển một phương pháp mới để tạo dịch thẩm thấu làm giàu H2 bằng phương pháp thẩm thấu ngược H2 được tạo thành thông qua quá trình điện phân nước máy tinh khiết, và chứng minh rằng so với chạy thận nhân tạo với lọc máu tiêu chuẩn, lọc máu bằng dịch lọc làm giàu H2 cải thiện kiểm soát huyết áp ở bệnh nhân mãn tính duy trì chạy thận nhân tạo17,18. Mức độ ảnh hưởng của H2 đối với huyết áp chỉ rõ ràng ở những bệnh nhân có huyết áp tâm thu sau lọc máu cao hơn 140 mmHg. Dựa trên bằng chứng của thử nghiệm lâm sàng này, chúng tôi đã điều tra xem H2 có tác dụng chống tăng huyết áp hay không một mô hình chuột của bệnh tăng huyết áp.

Hình 1. Sơ đồ phát triển thiết bị hít H2 chuẩn độ. (a) Một máy dò khí di động được đặt tại chín khu vực của hộp thuốc mê (được biểu thị bằng các số khoanh tròn) và nồng độ khí được đo. MỘT Tổng cộng có 10 lỗ được khoan trên hai mặt của hộp để cải thiện sự đồng nhất của nồng độ khí. (NS) Kết quả đo nồng độ O2 trước khi khoan lỗ. Nồng độ te giảm nhanh hơn ở các khu vực gần cửa thoát khí hơn. (c) Kết quả đo nồng độ O2 ở 10 lỗ được khoan trên hai các mặt của hộp. Với các lỗ, sự giảm nồng độ oxy trở nên đồng đều giữa tất cả chín khu vực. (d) Nồng độ H2 bắt đầu tiêm. Nồng độ H2 tăng đồng đều ở tất cả các khu vực và không khí trong hộp đã được thay thế bằng H2 afer bơm vào 2 phút.

Kết quả : Phát triển hệ thống hít H2 chuẩn độ. Để xác định tỷ lệ H2 thích hợp, chúng tôi ước tính rằng các thông số hô hấp của chuột như sau: thể tích thủy triều, 2 mL; tốc độ hô hấp, 115 mỗi phút; và nồng độ CO2 thở ra, 4%. Dựa trên các thông số này, chúng tôi ước tính khối lượng mỗi phút là 0,23 L / phút, với thể tích bài tiết CO2 là 9,2 × 10–3 L / phút. Quy định nồng độ CO2 cho phép trong hộp nhỏ hơn 0,1% dẫn đến tỷ lệ thức ăn khí yêu cầu được tính toán là> 9,2 L / phút; do đó chúng tôi đã sử dụng một loại khí đốt tỷ lệ gà 10 L / phút. Chúng tôi đã kiểm tra tính đồng nhất của khí gas trong hộp bằng cách tạo bọt khí nitơ tinh khiết ở 10 L / min và đo nồng độ O2 tại chín vị trí khác nhau. Chúng tôi nhận thấy rằng nồng độ O2 giảm nhanh hơn gần đầu ra của hộp (tức là khu vực 3, 4, 7 và 8; Hình 1a) hơn so với các khu vực khác (Hình 1b). Để giải quyết sự không đồng nhất này, chúng tôi đã khoan các lỗ trên cả hai mặt của hộp, điều này mang lại tốc độ giảm O2 đồng đều nồng độ ở tất cả các vị trí (Hình 1c). Ngoài ra, cần khoảng 2 phút cho nồng độ O2 để đạt đến 0%, cho thấy rằng cần ít nhất 2 min để tẩy sạch trước khi thu được nồng độ khí ổn định. Khi cho hỗn hợp khí gồm 1,3% H2 và 21% O2 trong N2 vào hộp thì nồng độ H2 là đều ở tất cả các khu vực, đạt 1,3% khoảng 2 phút kể từ khi bắt đầu có khí gas (Hình 1d). 4 tuần (Hình bổ sung. S1a). Te một giai đoạn 5/6 Nx do bác sĩ phẫu thuật lành nghề tiến hành bằng vi phẫu mang lại kết quả có thể lặp lại với rất ít sai số, bằng chứng là mức độ tổn thương thận là đồng nhất giữa các cá thể (Hình bổ sung. S1b – e). Hai nhóm đã không chậm lại trong thời gian của thay đổi thể tích nước tiểu (Hình bổ sung S1b), độ thanh thải creatinin (Hình bổ sung S1c), urê máu nitơ (BUN) (Hình bổ sung S1d), creatinine (Hình bổ sung S1e), hoặc trọng lượng thận (Hình bổ sung S1f.). Đáng chú ý, nhóm 5/6 Nx + H2 cho thấy khả năng phục hồi cân nặng sau mổ nhanh hơn so với nhóm chứng 5/6 Nx (P = 0,08), mặc dù sự khác biệt về trọng lượng cơ thể giữa hai nhóm đã biến mất sau 4 tuần (Hình bổ sung. S1g). Huyết áp động mạch Te, được đo bằng đầu dò áp suất đặt ở bên phải động mạch đùi 4 tuần trước 5/6 Nx, ở nhóm 5/6 Nx + H2 thấp hơn đáng kể so với nhóm chứng 5/6 Nx nhóm (Hình bổ sung. S1h – j). Kết quả cho thấy liệu pháp H2 kéo dài 1 giờ mỗi ngày có thể ngăn chặn mức tăng huyết áp 5/6 Nx mà không ảnh hưởng đến mức độ suy thận.

     Điều trị bằng H2 có tác dụng chống tăng huyết áp xảy ra ngay cả khi điều trị chậm trễ. Huyết áp có thể đã giảm vì H2 làm giảm quá trình viêm nhiễm liên quan đến việc cắt thận. Để kiểm tra giả thuyết này, chúng tôi đã kiểm tra xem liệu tình trạng giảm huyết áp vẫn tồn tại ngay cả khi bắt đầu hít phải H2 3 tuần afer 5/6 Nx. Huyết áp được đo hàng tuần bằng cách sử dụng cuf đuôi. Bốn con chuột bị nhiễm 5/6 Nx; trong số này, 4 con chuột có huyết áp trung bình không tăng lên 105 mmHg hoặc hơn 3 tuần trước 5/6 Nx là bị loại khỏi các thí nghiệm tiếp theo. 30 con chuột còn lại được phân ngẫu nhiên để điều trị và kiểm soát nhóm (Hình 2a). Bốn tuần điều trị H2 1 giờ mỗi ngày làm giảm đáng kể huyết áp tâm thu và huyết áp trung bình so với nhóm đối chứng (Hình 2b – d). Nó cũng cho thấy xu hướng giảm nhịp tim, mặc dù sự khác biệt giữa 2 nhóm không đáng kể (Hình 2e).

     H2 làm giảm bớt sự mất cân bằng hệ thần kinh tự chủ ở 5/6 con chuột bị thận hư. Kiểm tra chi tiết hơn về phản ứng chống tăng huyết áp của H2, chúng tôi đã tiến hành theo dõi máu liên tục và mãn tính áp suất bằng phương pháp không xâm lấn với hệ thống đo từ xa cấy ghép không dây (Hình 3a). Hít khí được bắt đầu vào ngày 5/6 Nx và tiếp tục trong 4 tuần. Một lần nữa, không có sự khác biệt trong quá trình thời gian của thay đổi chức năng thận giữa hai nhóm (Hình bổ sung. S2a, b). Thời gian hít khí dài hơn dẫn đến giảm huyết áp nhiều hơn ở nhóm 5/6 Nx + H2, so với nhóm 5/6 Nx đối chứng (P <0,05) (Hình 3b). Khi điều trị tiếp tục, xu hướng giảm nhịp tim trở nên rõ rệt hơn trong nhóm 5/6 Nx + H2, nhưng sự khác biệt không đáng kể (Hình 3c). Để kiểm tra mức độ ảnh hưởng của liệu pháp H2 đối với hoạt động của hệ thần kinh tự chủ, chúng tôi đã tiến hành phân tích quang phổ về sự thay đổi huyết áp. Các thành phần quang phổ thu được theo đơn vị chuẩn hóa (nu). Tần số thấp Công suất (LF) biểu thị một giai điệu chủ yếu là giao cảm, trong khi tần số cao (HF) chỉ ra một giai điệu chủ yếu là phó giao cảm. Mặc dù sự gia tăng công suất LF và giảm công suất HF theo thời gian liên quan đến 5/6 Nx cho thấy xu hướng bị ức chế khi hít phải H2, kết quả không đáng kể khi so sánh với biến liên tục trong một khóa học thời gian 4 tuần (Hình bổ sung. S2c, d). Ngược lại, so sánh sự thay đổi từ mức cơ bản (ngày 0) đến 4 tuần sau khi bắt đầu hít phải H2, sự gia tăng công suất LF và giảm HF quyền lực quan sát được ở nhóm 5/6 Nx đối chứng bị triệt tiêu đáng kể ở nhóm 5/6 Nx + H2 (Hình 3d, e). Tiếp theo, chúng tôi kiểm tra xem liệu pháp H2 kéo dài 1 giờ mỗi ngày có làm giảm huyết áp, nhịp tim và hoạt động thần kinh tự chủ ngay cả trong thời gian hoạt động về đêm hay không. Chúng tôi đã phân tích dữ liệu huyết áp và nhịp tim trong 60 phút được ghi nhận trong khoảng thời gian từ 1 giờ 30 phút đến 2 giờ 30 phút, tức là ở giữa pha tối (từ 21 giờ đến 7 giờ ngày hôm sau). Thời gian điều trị dài hơn dẫn đến giảm huyết áp, nhịp tim và công suất LF nhiều hơn và tăng Công suất HF ở nhóm 5/6 Nx + H2 so với nhóm 5/6 Nx đối chứng (Hình 3f – i).

Thảo luận : Tis là nghiên cứu đầu tiên chứng minh tác dụng dược lý của H2 đối với bệnh tăng huyết áp ở chuột. Chúng tôi nhận thấy rằng việc cho 5/6 con chuột Nx tiếp xúc với 1,3% H2 trong 1 giờ mỗi ngày trong 4 tuần bị ức chế đáng kể, sự gia tăng huyết áp do 5/6 Nx. H2 có thể làm giảm huyết áp chỉ bằng cách giảm viêm tại chỗ ở thận do 5/6 Nx. Chúng tôi đã kiểm tra điều này bằng cách lặp lại thí nghiệm trên những con chuột đã hồi phục hoàn toàn sau cuộc xâm lấn phẫu thuật. H2 điều trị bằng đường hô hấp được bắt đầu vào 3 tuần trước 5/6 Nx và tiếp tục trong 4 tuần; Huyết áp được đo hàng tuần trong suốt thời kỳ nàyi. Kết quả của chúng tôi phỏng đoán rằng H2 làm giảm đáng kể lượng máu áp suất ở 5/6 Nx chuột trong giai đoạn mãn tính, hỗ trợ rằng H2 có tác dụng chống tăng huyết áp độc lập với đặc tính chống viêm của nó trong giai đoạn chu phẫu. Để điều tra chi tiết hơn sự lây nhiễm của H2 lên huyết áp, chúng tôi đã sử dụng một hệ thống đo từ xa được cấy ghép để liên tục theo dõi huyết áp. Thí nghiệm của Tis cho thấy H2 có tác dụng chống tăng huyết áp không chỉ khi nghỉ ngơi ban ngày, mà còn trong giai đoạn hoạt động về đêm. Phân tích quang phổ của chúng tôi về huyết áp sự thay đổi cho thấy rằng H2 đã giảm thiểu sự mất cân bằng tự trị gây ra từ 5/6 Nx, cụ thể là bằng cách áp dụng hệ thần kinh giao cảm hoạt động quá mức và tăng cường hoạt động của hệ thần kinh phó giao cảm; hoàn hảo này trùng hợp với các đợt hạ huyết áp của nó.

     Nghiên cứu trước đây của chúng tôi cho rằng H2 hít vào làm giảm huyết áp bằng cách tác động trực tiếp lên não. Phần lớn gần đây, chúng tôi đo động lực H2 trong máu của lợn tạo ra một hơi thở H2 19. Kết quả thử nghiệm của chúng tôi cho thấy H2 không đơn giản được thải ra khỏi phổi mà còn được vận chuyển mạnh mẽ qua động mạch máu đến các cơ quan trên khắp cơ thể, nơi nó được chuyển hóa năng động. Lượng H2 hít vào tăng lên nồng độ H2 trong máu động mạch cảnh cao hơn bất kỳ nơi nào khác trong cơ thể. Tese quan sát thấy các động lực cho nồng độ H2 trong máu người không hít phải H2 cho thấy rằng máu của nó Giảm áp suất được thực hiện thông qua một tác động trực tiếp lên não.

     Bằng chứng chỉ ra rằng tăng huyết áp ở 5/6 chuột Nx là qua trung gian tăng cường giao cảm hoạt động thần kinh gây ra bởi sự tương tác gây bệnh giữa thận và não. Nó đã được báo cáo rằng Tỷ lệ luân chuyển norepinephrine từ các nhân sau vùng dưới đồi ở chuột 5/6 Nx lớn hơn so với đối chứng chuột 20. Thân rễ hai bên lưng đã được chứng minh là có thể ngăn ngừa sự gia tăng huyết áp và norepinephrine doanh thu ở nhân sau vùng dưới đồi21. Kết quả tese chỉ ra rằng tăng xung động cảm giác ở thận là được tạo ra trong thận bị thương và truyền đến não, nơi chúng kích thích các trung tâm vận mạch, do đó kích hoạt hoạt động thần kinh giao cảm kích thích hệ thống tim mạch và thận và dẫn đến sự phát triển của tăng huyết áp22,23. Kết quả của chúng tôi cho thấy H2 có tác dụng chống tăng huyết áp mà không ảnh hưởng đến mức 5/6 rối loạn chức năng thận liên quan đến Nx; điều này hỗ trợ kết luận rằng H2 tác động trực tiếp lên não hơn là bằng cách giảm việc tạo ra các xung động cảm giác ở thận, làm giảm việc tạo ra các xung động cảm giác ở thận. Tiềm năng điều trị của Te đối với H2 ở người là rất hứa hẹn, nhưng nghiên cứu vẫn đang ở giai đoạn đầu. Các báo cáo về việc cân bằng H2 trong hệ thống thần kinh tự trị đã được sử dụng trong việc bán các mặt hàng liên quan đến H2. H2 đã được quảng cáo để cải thiện nhiều tình trạng bao gồm bệnh thần kinh tự trị, chứng mất ngủ, trầm cảm, mỏi vai, đau đầu, chán ăn và các bệnh liên quan đến căng thẳng. Không ai trong số này có đã được thực nghiệm chứng minh; đây là nghiên cứu thử nghiệm đầu tiên cho thấy H2 cải thiện tính tự chủ sự mất cân bằng. Tuy nhiên, những nhiễm trùng này chưa được chứng minh ở người, và cơ chế mà điều này hiệu quả  đạt được vẫn chưa được biết. Nghiên cứu tiền lâm sàng và nghiên cứu lâm sàng của chúng tôi trước đây đã chứng minh rằng H2 làm giảm tổn thương cơ quan do thiếu máu cục bộ - tái tưới máu trong các tình huống cấp cứu y tế khác nhau, bao gồm nhồi máu cơ tim2,24, sốc xuất huyết5,25 và ngừng tim xuất viện3,4 , cũng như trong nội tạng cấy ghép26. Chọn lọc gốc hydroxyl (• OH) có chọn lọc đã được chấp nhận rộng rãi là cơ chế tác dụng của H2. Mặc dù H2 đã được chứng minh là loại bỏ chọn lọc • OH trong ống nghiệm27, liệu H2 làm giảm stress oxy hóa bằng cách loại bỏ • OH ở cấp độ tế bào và mô vẫn chưa rõ ràng. Kích hoạt các dây thần kinh giao cảm có thể dẫn đến huyết áp cao. Hirooka và cộng sự. cho thấy rằng một vùng não, tủy bên ngực bụng (RVLM), rất quan trọng đối với việc kích hoạt các dây thần kinh giao cảm, với sự giảm trong hoạt động oxit nitric và tăng sản xuất ROS trong RVLM theo cơ chế có thể có của nó 28–30. Campese và cộng sự. cũng cho thấy rằng tăng sản xuất ROS xảy ra trong não trong quá trình kích hoạt giao cảm trung ương, xảy ra trong quá trình chấn thương thận31,32. H2 có thể ức chế hoạt động giao cảm trung ương bằng cách quét ROS trong RVLM, do đó làm giảm huyết áp và nhịp tim.

     Mặc dù không phải là trọng tâm của nghiên cứu của chúng tôi, điều đáng chú ý là điều trị H2 sau phẫu thuật làm giảm mức độ giảm cân và thúc đẩy phục hồi cân nặng sau phẫu thuật cắt thận. Giảm cân sau phẫu thuật ở người góp phần vào tiên lượng xấu do tăng khả năng biến chứng và làm suy yếu hiệu quả của hóa trị liệu. Kết quả của chúng tôi cho thấy rằng nếu những nhiễm trùng này xảy ra ở người, việc sử dụng H2 sau phẫu thuật có thể rút ngắn thời gian nằm viện và cải thiện tiên lượng của bệnh nhân trước nhiều loại phẫu thuật. Lượng H2 cần thiết có thể thay đổi tùy thuộc vào nhiễm trùng sinh học đang được nhắm mục tiêu. Vì đây là nghiên cứu đầu tiên nhằm điều tra các tác nhân gây nhiễm H2 trong điều trị tăng huyết áp, chúng tôi đã sử dụng H2 với nồng độ đặc biệt cao (1,3%) để đảm bảo rằng bất kỳ vi khuẩn nào cũng được phát hiện. Trên thực tế Nồng độ H2 tối đa cho phép theo quy định của Nhật Bản được thêm vào một xi lanh chứa O2 là 1,3%, là một phần ba của giới hạn mức độ nổi tiếng thấp hơn là 4%. Kết quả của chúng tôi cho thấy ít nhất 1 giờ hít phải H2 mỗi cần phải có ngày để quan sát các thay đổi huyết động học; tuy nhiên, liệu việc hít phải H2 trong thời gian dài hơn có một tổng thể tốt hơn nên được đánh giá thêm. Cuối cùng, các nghiên cứu bổ sung được yêu cầu để làm sáng tỏ tính linh hoạt của H2 trên huyết áp ở các mô hình động vật khác bị tăng huyết áp. Kết luận, nghiên cứu của chúng tôi cho thấy liệu pháp H2 1 giờ hàng ngày làm giảm huyết áp ở mô hình chuột bị tăng huyết áp và cải thiện sự mất cân bằng của hệ thần kinh tự chủ do tăng huyết áp. Thêm vào Các nghiên cứu tiền lâm sàng được yêu cầu trước khi nghiên cứu dịch mã.

Phương pháp . Nghiên cứu Te đã được Tổ chức Chăm sóc và Sử dụng Động vật thông qua Ủy ban (Đại học Thú y và Khoa học Đời sống Nippon [Tokyo, Nhật Bản], Số 30 K-61; và Đại học Keio [Tokyo, Nhật Bản], số 13002-4). Việc phân bổ cho H2 và nhóm đối chứng được thực hiện ngẫu nhiên. Tất cả động vật các thí nghiệm đã được thực hiện theo các hướng dẫn ARRIVE34.

     Phát triển bộ máy hít H2. Chúng tôi đã tìm cách thiết lập một cách hít H2 được chuẩn độ chính xác hệ thống đồng thời cho phép hít khí và theo dõi huyết áp lưu động. Chúng tôi đã sử dụng một hộp thuốc mê (KN-1010 M, Natsume, Tokyo, Nhật Bản) để quản lý khí. Nồng độ oxy te là được đo bằng máy dò khí phức hợp cầm tay (GX-8000, Riken Keiki Co., Ltd., Tokyo, Japan) tại chín khu vực ở hộp (Hình 1a). Khí nitơ tinh khiết (Taiyo Nippon Sanso Corporation, Tokyo, Japan) đã được ủ trong hộp với tốc độ 10 L / phút, và nồng độ oxy được ghi lại trong chín khu vực cứ sau 5 s cho đến khi oxy nồng độ đạt 0% v / v. Để thiết lập lại không gian thử nghiệm, hộp đã được mở để thông gió cho mỗi và các phép đo được lặp lại ba lần trong mỗi khu vực. Để đạt được sự cuộn tròn đồng đều của hộp với khí, các lỗ có đường kính 2 mm đã được khoan tại các vị trí ở cả hai mặt của hộp để tạo ra tổng số 10 lỗ. lỗ, và thử nghiệm tương tự được lặp lại. Cuối cùng, 10 L / phút khí H2 (1,3% H2 + 21,0% O2 + 77,7% N2) (Taiyo Nippon Sanso Corporation, Tokyo, Nhật Bản) đã được tạo ra và nồng độ H2 và O2 được đo tại chín khu vực ở hộp sử dụng máy dò GX-2009 (GX-2009, Riken Keiki Co., Ltd., Tokyo, Japan). Chúng tôi phỏng đoán rằng bên trong của hộp được làm đầy đồng nhất với ga hỗn hợp

     Hít khí. Các bình khí để tiêm vào hộp thuốc mê đã được làm đầy khí H2 (1,3% H2 + 21,0% O2 + 77,7% N2) và khí điều khiển (21,0% O2 + 79,0% N2) tại nhà máy (Taiyo Nippon Sanso Corporation, Tochigi, Nhật Bản). Nhóm Te H2 và nhóm đối chứng lần lượt hít khí H2 trộn sẵn và khí đối chứng. Te gas fow tốc độ là 10 L / phút và các con vật được giữ trong hộp trong 1 giờ tại một thời điểm. Thêm 3 phút nữa đã được thiết lập để thanh lọc hộp (tức là tổng cộng 63 phút). Trong tất cả các quy trình thử nghiệm, ngày bắt đầu hít khí là được khử trùng đồng nhất vào ngày 0. Điều trị Te được lặp lại mỗi ngày trong 4 tuần.

     Thủ tục phẫu thuật cắt một phần thận. Để gây tăng huyết áp do thận, phẫu thuật cắt thận 5/6 đã được thực hiện như đã mô tả trước đây 35–37, với những chỉnh sửa nhỏ. Tóm tắt, những con chuột được gây mê bằng isofurane hít vào (cảm ứng ở mức 4%, duy trì ở mức 1,5%), và phẫu thuật mở bụng trên trung bình khoảng 4 cm là đã thực hiện. Các thủ tục phẫu thuật được thực hiện dưới kính hiển vi; các nhánh của động mạch thận trái là được xác định và sau đó được nối có chọn lọc với 7–0 chỉ khâu lụa càng gần thận trái càng tốt để gây nhồi máu tổng thể khoảng 2/3 của vỏ thận bên trái. Sau đó, động mạch thận phải, tĩnh mạch thận và niệu quản đã được thắt với 4–0 chỉ khâu lụa và thận phải đã được cắt bỏ. Tế bào thành bụng và da được đóng bằng 4–0 nylon chủ đề. Những con chuột được phẫu thuật bằng hình ảnh đã được phẫu thuật nội soi giống như 5/6 Nx ngoại trừ can thiệp phẫu thuật đến thận đã không được thực hiện. Thời gian gây mê te là 30 phút, là thời gian đồng nhất cho tất cả các con chuột. Đo huyết áp. Trong thí nghiệm đầu tiên, huyết áp động mạch được đo ở bên phải động mạch đùi sử dụng đầu dò áp lực (PE50, Natsume, Tokyo, Japan; DX-360, Nihon Kohden, Tokyo, Nhật Bản) tránh được 4 tuần hít phải khí trong điều kiện gây mê do hít isofurane. Trong thí nghiệm thứ hai, huyết áp và nhịp tim được đo bằng áp kế khối đuôi (BP-98A, Sofron, Tokyo, Nhật Bản) phương pháp. Huyết áp và nhịp tim được đo theo ba lần và giá trị trung bình được sử dụng làm giá trị đại diện cho cá nhân đó.

     Cấy máy phát đo xa. Chuột được gây mê bằng cách sử dụng isofurane và bẹn đùi khử trùng bằng chlorhexidine 1%. Một vết rạch dài khoảng 1,5 cm đã được thực hiện và động mạch đùi trái đã được tiếp xúc. Máy phát đo từ xa (HD-S10, Physiotel HD Telemetry, Data Science International, St. Paul, MN, Mỹ) catheter được đưa vào động mạch đùi trái38. Đầu te của ống thông máy phát đã được đặt ở động mạch chủ bụng từ chỗ phân đôi động mạch thận. Thân máy phát Te đã được lắp vào một túi dưới da được tạo ra ở lưng dưới bên trái, và da đã được khâu lại. Tất cả các can thiệp phẫu thuật là thực hiện một cách vô trùng.

     Theo dõi thông số huyết động liên tục. Huyết áp và nhịp tim liên tục được giám sát bằng hệ thống đo từ xa (Ponemah Ver. 6.3, Data Science International, St. Paul, MN, USA). Dữ liệu được ghi lại trong 60 phút trong một lồng sinh sản. Dữ liệu huyết áp thu được tại thời điểm 1 và 6 giờ sau khi ngừng hít vào đã được sử dụng để phân tích. Sau đó dữ liệu được ghi lại, những dữ liệu thu được trong 15 phút đầu tiên của mỗi khoảng thời gian đo được loại trừ khỏi phân tích. Dữ liệu được truy xuất trong 45 phút còn lại được chia thành các khối 5 phút. Hiển thị huyết áp và nhịp tim biến động lớn khi chuột di chuyển; do đó, trong mỗi khối dữ liệu 5 phút, các giá trị trong 1 phút đầu tiên ổn định phép đo được ghi lại và lấy trung bình. Phép đo ổn định được xác định dưới dạng dữ liệu không có chuyển động của cơ thể và không thiếu bất kỳ bộ phận nào do mất tín hiệu; nếu các điều kiện này không được đáp ứng, dữ liệu được coi là không hợp lệ.

     Phân tích phổ biến thiên huyết áp động mạch. Sự thay đổi huyết áp động mạch được phân tích bằng phần mềm hệ thống đo từ xa (Ponemah Ver. 6.3, Data Science International, St. Paul, MN, USA). Phân tích miền tần số (tốc độ lấy mẫu 500 Hz; tần số rất thấp [VLF], 0,05–0,25 Hz; LF, 0,25–1,0 Hz; HF, 1,0–3,0 Hz) được thực hiện bằng cách sử dụng dữ liệu dạng sóng áp lực động mạch của phút đầu tiên (khoảng 300–400 nhịp) cứ sau 5 phút. Tương tự như phương pháp được sử dụng để đánh giá các thông số huyết động, trong trường hợp có chuyển động của cơ thể hoặc bất kỳ dữ liệu bị thiếu nào do mất tín hiệu, phút tiếp theo đã được sử dụng và nếu tất cả là một phút các khoảng thời gian của khối 5 phút không hợp lệ, dữ liệu từ khối đó đã bị loại bỏ. Đo chức năng thận ở 5/6 con chuột bị cắt thận. Chức năng thận đã được đánh giá trước đó, một ngày phẫu thuật cắt thận , và hàng tuần bằng cách sử dụng máy phân tích máu cầm tay (hộp mực i-STAT CHEM8 +, Abbott Nhật Bản, Chiba, Nhật Bản; máy phân tích i-STAT, Abbott, Chicago, IL, Hoa Kỳ). Lượng nước tiểu hàng ngày được đo hàng tuần bằng cách sử dụng lồng trao đổi chất (KN-646, Natsume, Tokyo, Nhật Bản) và độ thanh thải creatinin (mL / phút / kg BW) được tính toán. Te Cân nặng của thận được đo vào cuối thí nghiệm sau 4 tuần hít khí.

     Phân tích Thống kê mô tả được trình bày dưới dạng sai số trung bình ± chuẩn của giá trị trung bình. Các phép so sánh được thực hiện bằng cách sử dụng phân tích phương sai, kiểm định t không ghép đôi, kiểm định t ghép đôi, hoặc kiểm định Mann – Whitney U, như phù hợp. Sau đó, thử nghiệm so sánh nhiều lần của Te Tukey là phân tích phương sai. Mô hình hỗn hợp Te được sử dụng để phân tích các biện pháp lặp lại. Tất cả các thử nghiệm đều có hai mặt và giá trị P <0,05 được coi là quan trọng về mặt thống kê. Tất cả các phân tích thống kê được thực hiện bằng GraphPad Prism 8.0 (GraphPad Sofware, Inc., La Jolla, CA, Hoa Kỳ). Tính khả dụng của dữ liệu Các bộ dữ liệu được tạo và / hoặc phân tích trong quá trình nghiên cứu hiện tại có sẵn từ tác giả tương ứng theo yêu cầu hợp lý

Nguồn : https://www.nature.com/scientific.report

https://www.nature.com/articles/s41598-020-77349-8.pdf?origin=ppub

Người dịch: Nước Thần Kỳ

Báo cáo khoa học được chấp nhận: ngày 9 tháng 11 năm 2020